L-iżvilupp ta' metodi affidabbli u standardizzati għall-ittestjar tas-suxxettibilità ta' swarm tan-nemus għall-insettiċidi huwa kruċjali biex tinftiehem l-effettività ta' ingredjenti jew formulazzjonijiet attivi ġodda. Il-metodi għall-ittestjar tas-suxxettibilità ta' swarm tan-nemus għall-insettiċidi jew prodotti ta' kuntatt (bħal dawk promossi fi programmi tas-saħħa pubblika) huma stabbiliti sew u standardizzati. Madankollu, il-metodi ta' ttestjar għal insettiċidi volatili jew aerosol użati fi prodotti tad-dar huma diffiċli biex jiġu implimentati b'mod effettiv. Abbażi tar-rakkomandazzjonijiet tal-Organizzazzjoni Dinjija tas-Saħħa għall-insettiċidi tad-dar, żviluppajna metodu standardizzat u ta' produzzjoni għolja għall-ittestjar ta' prodotti aerosol bl-użu ta' nemus fil-gaġeġ u metodu ta' diżinfezzjoni effettiv imwettaq f'kamra tat-test Peet-Grady (kamra tat-test PG). Ivvalidajna l-effettività ta' dan il-metodu ġdid bl-użu ta' popolazzjonijiet ta' nemus Aedes u Anopheles reżistenti għall-insettiċidi u suxxettibbli. Karatteristika ġdida ta' dan il-metodu hija l-inklużjoni ta' kamra diretta lejn il-gaġeġ tan-nemus, li tippermetti valutazzjoni kwantitattiva f'ħin reali tar-rati ta' qtil tan-nemus wara l-espożizzjoni għall-insettiċida. Id-diżinfezzjoni bit-tampuni tneħħi b'mod effettiv iż-żejt aerosol li fih il-piretrojdi residwu mill-wiċċ tal-kamra tat-test, b'rati ta' mortalità ta' inqas minn 2% għal nemus suxxettibbli ttestjati direttament fuq il-wiċċ tal-kamra. Ma ġiet osservata l-ebda eteroġeneità spazjali fir-rati ta' qtil jew mortalità fost in-nemus fil-gaġeġ fil-kamra PG. Il-metodu tagħna b'gaġġa doppja jipprovdi produzzjoni tmien darbiet ogħla mill-metodu tat-titjira ħielsa, li jippermetti ttestjar simultanju ta' razez differenti ta' nemus u diskriminazzjoni effettiva bejn popolazzjonijiet ta' nemus suxxettibbli u reżistenti ttestjati b'mod parallel.
Sal-lum, l-insettiċidi tal-ajrusol intużaw primarjament fid-dar għall-protezzjoni personali, b'użu limitat fi programmi tas-saħħa pubblika. Madankollu, studji reċenti wrew użu mifrux ta' insettiċidi fid-djar f'żoni fejn il-mard li jinġarr mill-vetturi huwa prevalenti. Kemm jekk il-motivazzjoni hija r-ripellant tan-nemus jew il-prevenzjoni tal-mard, hemm bżonn urġenti għal metodi standardizzati u faċli biex jintużaw għall-iskrinjar tal-popolazzjonijiet endemiċi tan-nemus għas-suxxettibilità għall-insettiċidi fid-djar. Dan huwa kruċjali biex wieħed ibassar l-effettività tal-insettiċidi kontra l-vetturi lokali u biex jifhem kif l-użu tal-insettiċidi fid-djar jinfluwenza l-għażla evoluzzjonarja għar-reżistenza għall-insettiċidi.
Il-Metodu Supplimentari 1 jipprovdi struzzjonijiet dettaljati pass pass għat-twettiq tal-programm tagħna ta' ttestjar ta' insettiċidi tal-aerosol.
Għalkemm il-linji gwida tad-WHO jirrakkomandaw l-użu ta' nebulizzaturi awtomatizzati, dawn ma jipprovdux speċifikazzjonijiet tekniċi speċifiċi. L-użu ta' nebulizzaturi awtomatizzati huwa kruċjali, peress li n-nebulizzazzjoni manwali f'kamra tal-propylene glycol mhux biss teħtieġ ħafna xogħol iżda tista' wkoll tikkawża inkonsistenzi spazjali u varjazzjonijiet fit-tul tan-nebulizzazzjoni.
Il-kompartiment tar-reazzjoni jrid jiġi sterilizzat wara kull test, iżda l-metodu ta' tindif intern rakkomandat fil-Linja Gwida tad-WHO jinvolvi l-applikazzjoni ta' ilma minn pajp. Fix-xogħol tagħna ta' kuljum, dan il-metodu huwa l-aktar pass li jeħtieġ ħafna xogħol fit-tħaddim ta' tagħmir bijoanalitiku, għalhekk żviluppajna u ttestjajna proċedura ta' sterilizzazzjoni bbażata fuq swab.
Il-partijiet tal-fann li jistgħu jitneħħew jiġu ttrattati kif deskritt hawn fuq, u x-xfafar u l-qafas tal-fann jitnaddfu bi sponża mxarrba f'soluzzjoni ta' 5% ta' Decon 90.
Abbażi tar-relazzjoni bejn it-tul tal-isprej u r-rata tal-kunsinna tal-prodott, id-dispenser tal-ajrusol tagħna wera wkoll preċiżjoni tajba fil-kontroll tal-proporzjon tad-dożaġġ tal-ajrusol, għall-inqas fuq il-medda ttestjata ta' 1 sa 4 darbiet. Kif muri fil-Fig. 3b, din il-karatteristika hija partikolarment importanti għall-karatterizzazzjoni tar-relazzjoni doża-rispons ta' formulazzjonijiet ġodda tal-ajrusol jew għad-determinazzjoni tad-doża ta' identifikazzjoni għall-iskoperta tar-reżistenza għall-insettiċidi.
Aħna nuru li l-protokoll rivedut tagħna għall-evalwazzjoni tal-insettiċidi tal-aerosols domestiċi, bl-użu ta' diżinfezzjoni bi swab, gaġeġ doppji, sprejers ikkontrollati mill-bogħod, u reġistrazzjoni bijometrika minn action cameras, huwa alternattiva aktar effettiva u fattibbli għall-protokoll attwali.WHOrakkomandazzjonijiet. Il-metodu ta' diżinfezzjoni bit-tampuni, li jeħtieġ biss 20 minuta, jiffranka l-ħin b'mod sinifikanti meta mqabbel mal-protokoll eżistenti (li tipikament jeħtieġ siegħa għal kull kamra tat-test). Inaqqas ukoll il-ħin li l-operaturi jqattgħu jilbsu t-tagħmir protettiv personali sħiħ (eż., elmi respiratorji u ħwejjeġ tax-xogħol antistatiċi). Barra minn hekk, dan il-metodu jiġġenera inqas likwidu u ħwejjeġ ikkontaminati għat-trattament minn tindif sħiħ tal-kamra tat-test, u b'hekk jimminimizza l-potenzjal ta' kontaminazzjoni tal-kamra li fiha l-kamra tat-test. Il-metodu ta' diżinfezzjoni bit-tampuni huwa wkoll adattat għad-diżinfezzjoni ta' kmamar tat-test semi-permanenti li jeħtieġuminimutqegħid ta' għamara f'varjetà ta' tqassim ta' kmamar.
Kwistjoni ewlenija esplorata f'dan l-istudju u f'oħrajn hija l-istandardizzazzjoni tad-dożi ta' espożizzjoni għall-insettiċidi applikati fl-ambjent f'diversi protokolli ta' ttestjar. Kif muri fil-Figura 2b, minkejja tul ta' żmien fiss tal-isprej, il-volum tal-isprej varja skont it-tipi ta' bottijiet tal-ajrusol, u potenzjalment jirrifletti d-differenzi fil-proċessi tal-manifattura (eż., pressjoni interna, użu ta' propellant, struttura taż-żennuna, eċċ.). Barra minn hekk, in-nuqqas attwali ta' apparati tal-isprej remoti disponibbli kummerċjalment bil-flessibbiltà meħtieġa fit-tul tal-isprej jillimita l-użu tagħhom fil-valutazzjoni tar-relazzjoni doża-rispons għall-kontroll tan-nemus. L-isprej manwali permezz ta' bokkaporti tat-test jew bokkaporti tal-aċċess (jekk disponibbli) jista' jwassal għal varjazzjonijiet fid-dożi ta' espożizzjoni. Fil-fatt, ir-riżultati tagħna jenfasizzaw il-ħtieġa u l-importanza li jitnaqqsu dawn is-sorsi ta' varjazzjoni. Għal popolazzjonijiet reżistenti ta' Aedes aegypti, osservajna korrelazzjoni bejn id-doża tal-ajrusol u d-determinazzjoni finali tas-suxxettibilità jew ir-reżistenza (Figura 3b). Idealment, id-dożi tal-ajrusol għandhom ikunu standardizzati fi grammi ta' sustanza aerosolizzata aktar milli fit-tul tal-aerosolizzazzjoni biex jiffaċilitaw it-tqabbil bejn studji differenti.
L-RCAD joffri approċċ alternattiv għal riċerka futura li jimminimizza l-impatt tal-varjazzjonijiet fil-proċess. Għalkemm sibna li l-istandardizzazzjoni tal-isprejs tal-ajrusol mhijiex fattibbli, wrejna li l-massa tal-ajrusol imwassla permezz ta' bottijiet tal-ajrusol differenti tista' tiġi stmata b'mod riproduċibbli billi jiġi kalibrat it-tul tal-isprej (Figuri 2b, 3a). Tali standardizzazzjoni tal-konċentrazzjoni tal-ajrusol fi kwalunkwe kamra tat-test hija kruċjali għat-titjib tar-riproduċibbiltà tar-riżultati.
Abbażi tal-esperjenza tagħna u ta’ gruppi ta’ riċerka oħra, ir-rakkomandazzjonijiet li jinsabu fil-Linja Gwida attwali rigward l-użu ta’ metodi ta’ skoperta tal-ajrusols għall-ittestjar tan-nemus li jtiru ħielsa joħolqu sfidi loġistiċi sinifikanti għal studji fil-laboratorju u semi-prattikament fuq il-post. Pereżempju, il-metodi ta’ skoperta tan-nemus li jtiru ħielsa għandhom produzzjoni baxxa ħafna (inkluż il-qbid mill-ġdid li jirrikjedi ħafna xogħol tan-nemus li jtiru ħielsa li jkunu baqgħu ħajjin) u jsofru minn numru ta’ limitazzjonijiet tekniċi, bħal diffikultajiet biex jiġu ddeterminati r-rati ta’ qtil f’ħin reali.
Għalkemm l-esperiment ivvalidat tagħna b'gaġġa doppja jindirizza l-kwistjoni tal-limitazzjonijiet tal-fluss u huwa metodu fattibbli għall-iskrinjar tas-suxxettibilità tan-nemus għall-insettiċidi tal-ajrusol, għandu jiġi nnutat li r-rati ta' mortalità tan-nemus tal-Gżejjer Cayman kienu sinifikament aktar baxxi fl-esperiment tal-gaġġa milli fl-esperiment tat-titjir ħieles (Fig. 5c, Tabella 1). Din id-differenza tista' tirrifletti tnaqqis fid-doża tal-insettiċida ġewwa l-gaġġa, peress li inqas qtar tal-ajrusol jippenetraw il-malja u jidħlu fil-gaġġa. Studji futuri jistgħu jużaw drappijiet b'malja akbar u disinji ta' gaġġa b'rati ogħla ta' fluss tal-arja tal-fann (eż., disinji ċilindriċi) biex jivvalidaw aktar ir-riżultati miksuba bil-metodi sperimentali differenti.
Ħin tal-posta: 02 ta' Frar 2026