Il-leishmaniasis vixċerali (VL), magħrufa bħala kala-azar fis-sottokontinent Indjan, hija marda parassitika kkawżata mill-protożon flagellat Leishmania li tista' tkun fatali jekk ma tiġix trattata fil-pront. Is-sandfly Phlebotomus argentipes huwa l-uniku vettur ikkonfermat tal-VL fix-Xlokk tal-Asja, fejn huwa kkontrollat permezz ta' bexx residwu fuq ġewwa (IRS), insettiċida sintetiku. L-użu tad-DDT fi programmi ta' kontroll tal-VL irriżulta fl-iżvilupp ta' reżistenza fis-sandflies, għalhekk id-DDT ġie sostitwit bl-insettiċida alpha-cypermethrin. Madankollu, alpha-cypermethrin jaġixxi b'mod simili għad-DDT, għalhekk ir-riskju ta' reżistenza fis-sandflies jiżdied taħt stress ikkawżat minn espożizzjoni ripetuta għal dan l-insettiċida. F'dan l-istudju, ivvalutajna s-suxxettibilità tan-nemus selvaġġi u d-dixxendenti F1 tagħhom bl-użu tal-bijoassaġġ tal-flixkun tas-CDC.
Ġbarna n-nemus minn 10 irħula fid-distrett ta’ Muzaffarpur f’Bihar, l-Indja. Tmien irħula komplew jużaw mediċini ta’ potenza għolja.ċipermetrinaGħall-isprejjar fuq ġewwa, raħal wieħed waqaf juża cypermethrin ta’ potenza għolja għall-isprejjar fuq ġewwa, u raħal wieħed qatt ma uża cypermethrin ta’ potenza għolja għall-isprejjar fuq ġewwa. In-nemus miġbura ġew esposti għal doża dijanjostika predefinita għal żmien definit (3 μg/ml għal 40 minuta), u r-rata ta’ tnaqqis u l-mortalità ġew irreġistrati 24 siegħa wara l-esponiment.
Ir-rati tal-qtil tan-nemus selvaġġ varjaw minn 91.19% sa 99.47%, u dawk tal-ġenerazzjonijiet F1 tagħhom varjaw minn 91.70% sa 98.89%. Erbgħa u għoxrin siegħa wara l-espożizzjoni, il-mortalità tan-nemus selvaġġ varjat minn 89.34% sa 98.93%, u dik tal-ġenerazzjoni F1 tagħhom varjat minn 90.16% sa 98.33%.
Ir-riżultati ta’ dan l-istudju jindikaw li reżistenza tista’ tiżviluppa f’P. argentipes, u dan jindika l-ħtieġa għal monitoraġġ u viġilanza kontinwi biex jinżamm il-kontroll ladarba tkun inkisbet l-eradikazzjoni.
Il-leishmaniasis vixċerali (VL), magħrufa bħala kala-azar fis-sottokontinent Indjan, hija marda parassitika kkawżata mill-protożoan flagellat Leishmania u trasmessa permezz tal-gidma ta' nemus tas-sand femminili infettati (Diptera: Myrmecophaga). In-nemus tas-sand huma l-uniku vettur ikkonfermat tal-VL fix-Xlokk tal-Asja. L-Indja tinsab qrib li tilħaq l-għan li telimina l-VL. Madankollu, biex jinżammu rati baxxi ta' inċidenza wara l-eradikazzjoni, huwa kritiku li titnaqqas il-popolazzjoni tal-vettur biex tiġi evitata trażmissjoni potenzjali.
Il-kontroll tan-nemus fix-Xlokk tal-Asja jitwettaq permezz tal-isprejjar residwu ġewwa (IRS) bl-użu ta' insettiċidi sintetiċi. L-imġiba sigrieta ta' mistrieħ tas-silverlegs tagħmilha mira adattata għall-kontroll tal-insettiċidi permezz tal-isprejjar residwu ġewwa [1]. L-isprejjar residwu ġewwa tad-dichlorodiphenyltrichloroethane (DDT) taħt il-Programm Nazzjonali ta' Kontroll tal-Malarja fl-Indja kellu effetti sinifikanti fil-kontroll tal-popolazzjonijiet tan-nemus u fit-tnaqqis sinifikanti tal-każijiet ta' VL [2]. Dan il-kontroll mhux ippjanat tal-VL wassal lill-Programm Indjan ta' Eradikazzjoni tal-VL biex jadotta l-isprejjar residwu ġewwa bħala l-metodu primarju ta' kontroll tas-silverlegs. Fl-2005, il-gvernijiet tal-Indja, il-Bangladesh, u n-Nepal iffirmaw memorandum ta' ftehim bil-għan li jeliminaw il-VL sal-2015 [3]. L-isforzi ta' eradikazzjoni, li jinvolvu taħlita ta' kontroll tal-vettur u dijanjosi u trattament rapidi ta' każijiet umani, kellhom l-għan li jidħlu fil-fażi ta' konsolidazzjoni sal-2015, mira riveduta sussegwentement għall-2017 u mbagħad għall-2020.[4] Il-pjan direzzjonali globali l-ġdid biex jiġu eliminati l-mard tropikali traskurat jinkludi l-eliminazzjoni tal-VL sal-2030.[5]
Hekk kif l-Indja tidħol fil-fażi ta' wara l-eradikazzjoni tal-BCVD, huwa imperattiv li jiġi żgurat li ma tiżviluppax reżistenza sinifikanti għall-beta-cypermethrin. Ir-raġuni għar-reżistenza hija li kemm id-DDT kif ukoll iċ-cypermethrin għandhom l-istess mekkaniżmu ta' azzjoni, jiġifieri, jimmiraw lejn il-proteina VGSC[21]. Għalhekk, ir-riskju ta' żvilupp ta' reżistenza fis-sandflies jista' jiżdied minn stress ikkawżat minn espożizzjoni regolari għal cypermethrin qawwi ħafna. Għalhekk huwa imperattiv li jiġu mmonitorjati u identifikati popolazzjonijiet potenzjali ta' sandflies reżistenti għal dan l-insettiċida. F'dan il-kuntest, l-għan ta' dan l-istudju kien li jiġi mmonitorjat l-istatus ta' suxxettibilità tas-sandflies selvaġġi bl-użu ta' dożi dijanjostiċi u tul ta' espożizzjoni determinati minn Chaubey et al. [20] studjaw P. argentipes minn irħula differenti fid-distrett ta' Muzaffarpur ta' Bihar, l-Indja, li kontinwament użaw sistemi ta' bexx fuq ġewwa ttrattati b'cypermethrin (irħula IPS kontinwi). L-istatus ta' suxxettibilità ta' P. argentipes selvaġġa minn irħula li kienu waqfu jużaw sistemi ta' bexx fuq ġewwa ttrattati biċ-ċipermetrina (ex-irħula IPS) u dawk li qatt ma kienu użaw sistemi ta' bexx fuq ġewwa ttrattati biċ-ċipermetrina (irħula mhux IPS) tqabbel bl-użu tal-bijoassaġġ tal-fliexken tas-CDC.
Intgħażlu għaxar irħula għall-istudju (Fig. 1; Tabella 1), li minnhom tmienja kellhom storja ta’ bexx kontinwu ġewwa ta’ piretrojdi sintetiċi (ipermetrina; magħżula bħala rħula b’ipermetrina kontinwa) u kellhom każijiet ta’ VL (mill-inqas każ wieħed) fl-aħħar 3 snin. Miż-żewġ irħula li fadal fl-istudju, raħal wieħed li ma implimentax il-bexx ġewwa ta’ beta-ċipermetrina (raħal li ma jisprejjax ġewwa) intgħażel bħala r-raħal ta’ kontroll u r-raħal l-ieħor li kellu bexx intermittenti ġewwa ta’ beta-ċipermetrina (raħal li jisprejja intermittenti ġewwa/raħal li qabel kien jisprejja ġewwa) intgħażel bħala r-raħal ta’ kontroll. L-għażla ta’ dawn l-irħula kienet ibbażata fuq koordinazzjoni mad-Dipartiment tas-Saħħa u t-Tim tal-Isprejjar ġewwa u l-validazzjoni tal-Pjan ta’ Azzjoni Mikro dwar l-Isprejjar ġewwa fid-Distrett ta’ Muzaffarpur.
Mappa ġeografika tad-distrett ta' Muzaffarpur li turi l-postijiet tal-irħula inklużi fl-istudju (1–10). Postijiet tal-istudju: 1, Manifulkaha; 2, Ramdas Majhauli; 3, Madhubani; 4, Anandpur Haruni; 5, Pandey; 6, Hirapur; 7, Madhopur Hazari; 8, Hamidpur; 9, Noonfara; 10, Simara. Il-mappa tħejjiet bl-użu tas-softwer QGIS (verżjoni 3.30.3) u Open Assessment Shapefile.
Il-fliexken għall-esperimenti ta' espożizzjoni tħejjew skont il-metodi ta' Chaubey et al. [20] u Denlinger et al. [22]. Fil-qosor, fliexken tal-ħġieġ ta' 500 mL tħejjew ġurnata qabel l-esperiment u l-ħajt ta' ġewwa tal-fliexken ġie miksi bl-insettiċida indikat (id-doża dijanjostika ta' α-cypermethrin kienet ta' 3 μg/mL) billi ġiet applikata soluzzjoni ta' aċetun tal-insettiċida (2.0 mL) mal-qiegħ, il-ħitan u l-għatu tal-fliexken. Kull flixkun imbagħad tnixxef fuq romblu mekkaniku għal 30 minuta. Matul dan iż-żmien, ħoll l-għatu bil-mod biex l-aċetun jevapora. Wara 30 minuta ta' tnixxif, neħħi l-għatu u dawwar il-flixkun sakemm l-aċetun kollu jevapora. Il-fliexken imbagħad tħallew miftuħa biex jinxfu matul il-lejl. Għal kull test replikat, flixkun wieħed, użat bħala kontroll, ġie miksi b'2.0 mL ta' aċetun. Il-fliexken kollha reġgħu ntużaw matul l-esperimenti wara tindif xieraq skont il-proċedura deskritta minn Denlinger et al. u l-Organizzazzjoni Dinjija tas-Saħħa [22, 23].
Fil-jum wara l-preparazzjoni tal-insettiċida, 30–40 nemusa maqbuda fis-selvaġġ (nisa bil-ġuħ) tneħħew mill-gaġeġ fil-kunjetti u ntefħu bil-mod f'kull kunjett. Bejn wieħed u ieħor l-istess numru ta' dubbien intuża għal kull flixkun miksi bl-insettiċida, inkluż il-kontroll. Irrepeti dan mill-inqas ħames sa sitt darbiet f'kull raħal. Wara 40 minuta ta' espożizzjoni għall-insettiċida, in-numru ta' dubbien li twaqqgħu ġie rreġistrat. Id-dubbien kollha nqabdu b'aspiratur mekkaniku, tpoġġew f'kontenituri tal-kartun ta' pinta mgħottija b'malja fina, u tpoġġew f'inkubatur separat taħt l-istess kundizzjonijiet ta' umdità u temperatura bl-istess sors ta' ikel (blalen tal-qoton mxarrba f'soluzzjoni taz-zokkor ta' 30%) bħall-kolonji mhux ittrattati. Il-mortalità ġiet irreġistrata 24 siegħa wara l-espożizzjoni għall-insettiċida. In-nemus kollha ġew dissezzjonati u eżaminati biex tiġi kkonfermata l-identità tal-ispeċi. L-istess proċedura twettqet mad-dubbien tal-frieħ F1. Ir-rati ta' twaqqigħ u mortalità ġew irreġistrati 24 siegħa wara l-espożizzjoni. Jekk il-mortalità fil-fliexken tal-kontroll kienet < 5%, ma saret l-ebda korrezzjoni tal-mortalità fir-repliki. Jekk il-mortalità fil-flixkun tal-kontroll kienet ≥ 5% u ≤ 20%, il-mortalità fil-fliexken tat-test ta’ dik ir-replika ġiet ikkoreġuta bl-użu tal-formula ta’ Abbott. Jekk il-mortalità fil-grupp tal-kontroll qabżet l-20%, il-grupp tat-test kollu tneħħa [24, 25, 26].
Mortalità medja tan-nemus P. argentipes maqbuda fis-selvaġġ. Il-vireg tal-iżbalji jirrappreżentaw żbalji standard tal-medja. L-intersezzjoni taż-żewġ linji orizzontali ħomor mal-graff (mortalità ta' 90% u 98%, rispettivament) tindika t-tieqa tal-mortalità li fiha tista' tiżviluppa r-reżistenza.[25]
Mortalità medja ta' nisel F1 ta' P. argentipes maqbud fis-selvaġġ. Il-vireg tal-iżbalji jirrappreżentaw żbalji standard tal-medja. Il-kurvi intersekati miż-żewġ linji orizzontali ħomor (mortalità ta' 90% u 98%, rispettivament) jirrappreżentaw il-medda ta' mortalità li fuqha tista' tiżviluppa reżistenza[25].
In-nemus fir-raħal ta' kontroll/mhux IRS (Manifulkaha) instabu li huma sensittivi ħafna għall-insettiċidi. Il-mortalità medja (±SE) tan-nemus maqbud fis-selvaġġ 24 siegħa wara t-twaqqigħ u l-espożizzjoni kienet ta' 99.47 ± 0.52% u 98.93 ± 0.65%, rispettivament, u l-mortalità medja tan-nisel F1 kienet ta' 98.89 ± 1.11% u 98.33 ± 1.11%, rispettivament (Tabelli 2, 3).
Ir-riżultati ta’ dan l-istudju jindikaw li n-nemus tas-sand nemus b’riġlejn il-fidda jistgħu jiżviluppaw reżistenza għall-piretrojde sintetiku (SP) α-cypermethrin f’irħula fejn il-piretrojde (SP) α-cypermethrin intuża b’mod rutinarju. B’kuntrast, in-nemus tas-sand nemus b’riġlejn il-fidda miġbura minn irħula mhux koperti mill-IRS/programm ta’ kontroll instabu li huma suxxettibbli ħafna. Il-monitoraġġ tas-suxxettibilità tal-popolazzjonijiet tan-nemus selvaġġi huwa importanti għall-monitoraġġ tal-effettività tal-insettiċidi użati, peress li din l-informazzjoni tista’ tgħin fil-ġestjoni tar-reżistenza għall-insettiċidi. Livelli għoljin ta’ reżistenza għad-DDT ġew irrappurtati regolarment fin-nemus tas-sand nemus minn żoni endemiċi ta’ Bihar minħabba pressjoni ta’ selezzjoni storika mill-IRS li juża dan l-insettiċida [1].
Sibna li P. argentipes huwa sensittiv ħafna għall-piretrojdi, u provi fuq il-post fl-Indja, il-Bangladesh u n-Nepal urew li l-IRS kellu effikaċja entomoloġika għolja meta użat flimkien ma’ cypermethrin jew deltamethrin [19, 26, 27, 28, 29]. Riċentement, Roy et al. [18] irrappurtaw li P. argentipes kien żviluppa reżistenza għall-piretrojdi fin-Nepal. L-istudju tagħna dwar is-suxxettibilità fuq il-post wera li d-dubbien tas-sand nemus b’riġlejn il-fidda miġbura minn irħula mhux esposti għall-IRS kienu suxxettibbli ħafna, iżda d-dubbien miġbura minn irħula intermittenti/ex-IRS u IRS kontinwi (il-mortalità varjat minn 90% sa 97% ħlief għad-dubbien tas-sand nemus minn Anandpur-Haruni li kellhom mortalità ta’ 89.34% 24 siegħa wara l-espożizzjoni) x’aktarx kienu reżistenti għal cypermethrin effettiv ħafna [25]. Raġuni waħda possibbli għall-iżvilupp ta’ din ir-reżistenza hija l-pressjoni eżerċitata mill-isprejjar ta’ rutina fuq ġewwa (IRS) u programmi lokali ta’ bexx ibbażati fuq il-każijiet, li huma proċeduri standard għall-immaniġġjar ta’ tifqigħat ta’ kala-azar f’żoni/blokki/irħula endemiċi (Proċedura Operattiva Standard għall-Investigazzjoni u l-Ġestjoni tat-Tifqigħat [30]. Ir-riżultati ta’ dan l-istudju jipprovdu indikazzjonijiet bikrija tal-iżvilupp ta’ pressjoni selettiva kontra s-cypermethrin effettiv ħafna. Sfortunatament, id-dejta storika dwar is-suxxettibilità għal dan ir-reġjun, miksuba bl-użu tal-bijoassaġġ tal-fliexken tas-CDC, mhijiex disponibbli għal tqabbil; l-istudji preċedenti kollha mmonitorjaw is-suxxettibilità għal P. argentipes bl-użu ta’ karta mimlija bl-insettiċida tad-WHO. Id-dożi dijanjostiċi tal-insettiċidi fl-istrixxi tat-test tad-WHO huma l-konċentrazzjonijiet ta’ identifikazzjoni rakkomandati tal-insettiċidi għall-użu kontra l-vetturi tal-malarja (Anopheles gambiae), u l-applikabbiltà operattiva ta’ dawn il-konċentrazzjonijiet għas-sandflies mhijiex ċara għaliex is-sandflies itiru inqas ta’ spiss min-nemus, u jqattgħu aktar ħin f’kuntatt mas-sottostrat fil-bijoassaġġ [23].
Piretrojdi sintetiċi ilhom jintużaw f'żoni endemiċi tal-VL fin-Nepal mill-1992, jalternaw mal-SPs alpha-cypermethrin u lambda-cyhalothrin għall-kontroll tas-sandfly [31], u deltamethrin ilu jintuża wkoll fil-Bangladesh mill-2012 [32]. Reżistenza fenotipika ġiet skoperta f'popolazzjonijiet selvaġġi ta' sandflies b'riġlejn il-fidda f'żoni fejn il-piretrojdi sintetiċi ilhom jintużaw għal żmien twil [18, 33, 34]. Mutazzjoni mhux sinonima (L1014F) ġiet skoperta f'popolazzjonijiet selvaġġi tas-sandfly Indjan u ġiet assoċjata mar-reżistenza għad-DDT, li tissuġġerixxi li r-reżistenza għall-piretrojdi tinqala' fil-livell molekulari, peress li kemm id-DDT kif ukoll il-piretrojde (alpha-cypermethrin) jimmiraw lejn l-istess ġene fis-sistema nervuża tal-insetti [17, 34]. Għalhekk, valutazzjoni sistematika tas-suxxettibilità għaċ-cypermethrin u monitoraġġ tar-reżistenza għan-nemus huma essenzjali matul il-perjodi ta' eradikazzjoni u wara l-eradikazzjoni.
Limitazzjoni potenzjali ta' dan l-istudju hija li użajna l-bijoassaġġ tal-kunjett tas-CDC biex inkejlu s-suxxettibilità, iżda t-tqabbil kollu uża riżultati minn studji preċedenti li jużaw il-kit tal-bijoassaġġ tad-WHO. Ir-riżultati miż-żewġ bijoassaġġi jistgħu ma jkunux direttament komparabbli għaliex il-bijoassaġġ tal-kunjett tas-CDC ikejjel it-tnaqqis fl-effett fl-aħħar tal-perjodu dijanjostiku, filwaqt li l-bijoassaġġ tal-kit tad-WHO ikejjel il-mortalità wara 24 jew 72 siegħa wara l-espożizzjoni (tal-aħħar għal komposti li jaħdmu bil-mod) [35]. Limitazzjoni potenzjali oħra hija n-numru ta' rħula bl-IRS f'dan l-istudju meta mqabbla ma' raħal wieħed mhux bl-IRS u raħal wieħed mhux bl-IRS/ex IRS. Ma nistgħux nassumu li l-livell ta' suxxettibilità għall-vettur tan-nemus osservat f'irħula individwali f'distrett wieħed huwa rappreżentattiv tal-livell ta' suxxettibilità f'irħula u distretti oħra f'Bihar. Hekk kif l-Indja tidħol fil-fażi ta' wara l-eliminazzjoni tal-virus tal-lewkimja, huwa imperattiv li jiġi evitat żvilupp sinifikanti ta' reżistenza. Huwa meħtieġ monitoraġġ rapidu tar-reżistenza fil-popolazzjonijiet tas-sandfly minn distretti, blokki u żoni ġeografiċi differenti. Id-dejta ppreżentata f'dan l-istudju hija preliminari u għandha tiġi vverifikata billi titqabbel mal-konċentrazzjonijiet ta' identifikazzjoni ppubblikati mill-Organizzazzjoni Dinjija tas-Saħħa [35] biex tinkiseb idea aktar speċifika tal-istatus ta' suxxettibilità ta' P. argentipes f'dawn l-inħawi qabel ma jiġu modifikati l-programmi ta' kontroll tal-vettur biex jinżammu popolazzjonijiet baxxi ta' sandfly u tiġi appoġġjata l-eliminazzjoni tal-virus tal-lewkimja.
In-nemusa P. argentipes, il-vettur tal-virus tal-lewkożi, tista’ tibda turi sinjali bikrija ta’ reżistenza għaċ-cypermethrin li huwa effettiv ħafna. Huwa meħtieġ monitoraġġ regolari tar-reżistenza għall-insettiċidi f’popolazzjonijiet selvaġġi ta’ P. argentipes biex jinżamm l-impatt epidemjoloġiku tal-interventi ta’ kontroll tal-vettur. Ir-rotazzjoni tal-insettiċidi b’modi ta’ azzjoni differenti u/jew l-evalwazzjoni u r-reġistrazzjoni ta’ insettiċidi ġodda hija meħtieġa u rakkomandata biex tiġi ġestita r-reżistenza għall-insettiċidi u tiġi appoġġjata l-eliminazzjoni tal-virus tal-lewkożi fl-Indja.
Ħin tal-posta: 17 ta' Frar 2025